Služby pro firmy a instituce
Rekombinantní kmeny a genetické konstrukty
Servisní jednotka nabídne přípravu a optimalizaci genetických konstruktů a expresních systémů pro různé typy mikroorganismů.
- izolace DNA a příprava kompetentních buněk
- návrh primerů a amplifikace cílových genů
- cílená mutageneze a příprava evolvovaných variant genů
- návrh a výběr vhodného expresního vektoru
- konstrukce plazmidových vektorů nebo integrace do chromozomu
- práce s RNA – izolace, příprava cDNA knihoven
Optimalizace růstových a produkčních vlastností
Jednotka zajistí optimalizaci kultivačních a produkčních parametrů mikroorganismů s využitím mikrobioreaktorového systému BioLector XT/RoboLector nebo kultivací na baňkách.
- screening růstových vlastností v aerobním i anaerobním režimu
- testování expresních systémů v komplexním mediu
- převod růstu z komplexních médií do definovaných minimálních médií
- příprava inokulačních kultur (standardizace OD, CFU, růstové fáze),
- optimalizace kultivačních parametrů (pH, teplota, koncentrace induktorů)
- testování tolerance k farmakologicky aktivním látkám
- charakterizace růstových křivek pod selekčním tlakem (zdroj C/N, pH, teplota, aerace, těžké kovy apod.)
- součástí nabídky bude také příprava a archivace mikrobiálních kmenů a kryokonzervace dalšího biologického materiálu podle požadavků zadavatele
Kultivace v laboratorním měřítku
Servisní práce umožní provádět kultivace v rozsahu od baňkových experimentů až po bioreaktory do objemu 10 L za definovaných podmínek se snímáním on-line parametrů.
- kultivace v shake flasks (50–500 mL)
- screening izolátů v mikrobioreaktorovém systému BioLector XT/RoboLector s on-line monitoringem růstových parametrů
- kultivace ve stolních bioreaktorech (1–5 L, případně 6–12 L)
- realizace batch a fed-batch strategií
- řízení parametrů kultivace (pH, DO, teplota, provzdušňování, míchání)
Downstream procesy (purifikace a zpracování proteinů)
V oblasti purifikace a zpracování proteinů bude středisko zajišťovat následující služby:
- afinitní chromatografie (Ni-NTA, TALON)
- ověření čistoty proteinu pomocí SDS-PAGE elektroforézy
- stanovení koncentrace proteinů spektrofotometricky
- příprava biomasy a buněčných extraktů (optimalizace dezintegrace)
- stabilizace a uchovávání produktů (lyofilizace, formulace)